G2-7 薬物動態・毒性評価支援（in vitro）

ユニット名

支援担当者

支援技術のキーワード

In vitro ADMET、薬物動態評価、物性評価、心毒性評価

支援技術の概要

１．物性、薬物動態評価

物性、in vitro ADMET試験では下記の項目の支援を行う。

１）溶解度、LogD測定
化合物のリン酸緩衝生理食塩水（PBS）に対する溶解度（100 μM）を測定する。測定に使用する液体クロマトグラフィーの溶出時間から、化合物のLogD値を算出する。

２）膜透過性試験
Caco-2細胞や人工脂質膜を用いたParallel Artificial Membrane Permeability Assay（PAMPA）により化合物の膜透過性を測定する。

４）血漿タンパク結合性試験
ヒト、マウス等依頼に応じ各種の血漿を用いて、血漿タンパク質に対する化合物の結合性を測定する。

５）CYP阻害性試験
ヒト肝ミクロソーム画分と6種のCytochrom P450 (CYP)に対するモデル基質を用いて、化合物のCYP阻害性を測定する。

６）CYP誘導性試験
化合物によるヒトCYP3A4の誘導能を測定する。

２．心毒性評価

ヒトiPS細胞由来心筋細胞を用いて、Ca fluxにより心室の脱分極から再分極までの時間を表す指標であるQT延長（心電図の QRS 群の開始から T 波終了までの時間であるQT 間隔）等を測定し、心毒性評価を行う。

３．創薬支援機器

In vitro ADMETの各試験項目に応じた実験機器を揃えており、液体クロマトグラフィー・タンデム質量分析法(Liquid Chromatography-tandem Mass Spectrometry: LC-MS/MS)により測定を行っている。

心毒性試験については、Functional Drug Screening System (FDSS)を用いてCa fluxアッセイを行っている。

支援技術の利用例

In vitroにおいて活性が認められた化合物を用いてin vivoの薬効試験を行った際、期待される薬効が得られないケースがある。その理由として、化合物の溶解度や体内動態に問題があり、生体内の疾患ターゲットに作用していない場合や、化合物の毒性により実験動物に障害が出る場合などがある。よってin vivo薬効試験を行う前に、in vitro ADMET（物性、薬物動態、毒性）の評価を行うことにより、化合物の問題点抽出や、物性や体内動態、毒性面に優れた化合物の選別が可能となる。

支援担当者の研究概要

製薬会社で行われているin vitro ADMET試験の技術移転を受けて、大阪大学薬学研究科附属創薬センター(Drug Innovation Center：DiNC)の構造展開ユニット（Lead Exploration Units: LEU）に所属する創薬研究者が本支援を担当している。LEUには、製薬企業出向、出身の創薬化学研究者も在籍しており、in vitro ADMET試験結果を受けて化合物の問題点改善の助言を受けられる。

大阪大学大学院薬学研究科創薬サイエンス研究支援拠点HP：http://www.phs.osaka-u.ac.jp/souyaku_kyoten/
DiNC構造展開ユニットHP：http://www.phs.osaka-u.ac.jp/souyaku_kyoten/about/leu.html